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用750g、口径4cm的瓶,也可采用广口瓶或罐头瓶。拌料装瓶主料与辅料等先拌匀,把糖溶于水中而后逐渐加入料中并充分拌匀,每100kg干料加水140?160kg,以手紧握料指缝中有少量水滴下为宜。采用徒手或装瓶机分装,要求松紧适中,直至离瓶口1cm处,压平,中央用捣木打孔至瓶底,洗净瓶口、瓶壁污物,瓶口用牛皮纸包好。灭菌接种常压100兀灭菌,持续8?12h,高压灭菌121兀,保持1.5h。待冷却后,在无菌条件下接入菌种。然后放到培养室,控制温度25兀,室内相对湿度控制在70%以下。培养室内保持黑暗状态,以利菌丝生长。一般经20d发菌培养,当菌丝长至1/2瓶时,可以除去封口纸,搬至于实体发生室。此时控温25兀?28兀,相对湿度增至90%~95%,保持空气清新,增强漫射光。菌盖不断生长,直至四周白色生长圈消失,即停止生长扩大,但仍可继续加厚。子实体形成菌管,弹射出红褐色孢子。
第3个是六芝和灵芝之间的联系,在中国古代“灵芝”一词有很多含义,而《神农本草经》中的六芝只是根据药性进行系统的分类。人们将灵芝当作祥瑞,大概认为它有“灵”,主要是由药性和丰富的象征意象共同决定。一些专家学者将六芝与灵芝进行对比分析得出结论:六芝从根本上说,它的组成只是由赤芝和紫芝。《神农本草经》中记载的黄芝、白芝、青芝、黑芝四芝,在其他古代药物著作中,对它们的记载很少,对它们的记载,第1个是《本草纲目》,书中是这样描述的:黑芝又非常撤且多黄白,稀有黑青者;第2个是《瑞应图》,书中是这样描述的:芝草常以六月生,春青、夏紫、秋白、冬黑。根据现代的药物研究者研究和查找相关药物著作得出:赤芝在成长阶段,初的菌盖是白色或者是黄白色,紫芝的菌盖颜色比较深,接近于黑色。古代医学著作中所记载的黄芝、白芝、青芝、黑芝四芝也可能指的就是赤芝及紫芝。一些药物学家认为,灵芝的主要特征是菌盖的外形像人的肾脏,半圆形或者类似于圆形,表面颜色呈褐黄色或红梅色,有很好的光泽性,还具有菌柄。菌肉的上半部分的颜色较浅,下半部分较深,与许多医学著作所记载赤芝很相似,因此赤芝这一类灵芝可以作为灵芝的代表的说法是很有权威性的,推测古代医学著作中的灵芝就是赤芝。
加葡萄糖(处理③)。在基础配方中添加牛肉膏和蛋白胨后,虫草生长与只添加无机盐相比没有明显差别,推测牛肉膏和蛋白胨提供的主要营养物质———磷酸盐、碳源、氮源和维生素在磷酸二氢钾和硫酸镁存在的情况下已并非限制性因子,即达到了营养饱和。因此再添加并不能有促进生长作用,反而由于添加物质过多导致培养基缝隙过密,不利于出草。处理⑤和处理⑥的无机盐和葡萄糖添加量相等,但分别添加了牛肉膏和蛋白胨,虫草生长出现统计学差异,这可能是由于牛肉膏和蛋白胨分别添加导致培养基中C:N比例改变,牛肉膏中提供大量碳源,而蛋白胨提供大量氮源,而只有在合适的C:N前提下,虫草子实体才能正常生长[7]。在葡糖糖提供了足够碳源的基础上,培养基中添加蛋白胨更适合虫草生长。在大米培养基中只添加有机质(处理②),虫草的生长和只添加无机盐相当,因此,在实际生产中,性质稳定而价格较低的无机盐更为实用。段木熟料栽培灵芝生产工序多,菌棒污染原因多,每一个生产环节不注意都有可能造成芝棒污染。坚决杜绝不严格执行操作规程,完全凭经验、想当然地进行段木灵芝生产的做法。一般而言,在品种优良,菌种生长良好,段木基质适宜,灭菌彻底,接种操作规范,培养条件适合,菌木达到生理成熟,芝棒下地及田间管理到位的条件下,就能够生产出优质的灵芝产品。
免疫调节作用灵芝抱子在传统中药中用来调节免疫系统已有较长历史.Pan等閔观察灵芝抱子多糖对甲基硝基亚硝基胍(MNNG)诱发胃癌大鼠的免疫性和抗氧化活性的影响发现,给予患胃癌大鼠灵芝抱子多糖后,可以降低血清和胃组织中脂质过氧化产物水平,并使胃癌所致的血清SOD、CAT和GSH-Px水平趋于正常,表明灵芝抱子多糖具有一定的免疫调节作用和抗氧化作用.实验发现,灵芝抱子可以提高ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化能力,增强SR-BC诱导的小鼠足肿胀,增加溶血空班数等,表明灵芝抱子主要通过作用于免疫细胞增强其活性,从而直接或间接调节机体免疫功能. 抗氧化作用灵芝的抗氧化作用与多糖有关,并与多糖的单糖组成、分子量有较大关系.Heleno等28在对灵芝不同部位多糖的提取中发现,灵芝菌丝体中提取的多糖含量,灵芝抱子中提取的多糖抗氧化活性,其DPPH率为0.15mg/mL,还原能力为0.69mg/mL,均比其他部位提取的多糖抗氧化能力强.Deepalakshmi 实验发现灵芝抱子的乙醇提取物表现出强烈的抗氧化活性,其体外抗氧化活性显示,灵芝抱子的乙醇提取物对ABST、DPPH、OH-、O2-的体外能力均较抗坏血酸低,但相差不大.
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